پاڼه_بینر

خبرونه

په مکرر ډول پوښتل شوي د سیل کلتور پوښتنې

1. که زه د منجمد حجرو ټیوب ترلاسه کړم، ایا زه کولی شم په مستقیم ډول د ذخیره کولو لپاره مایع نایتروجن ته واچوم؟

په ډیرو مواردو کې، هغه حجرې چې په وچه یخ (-80 ° C) کې لیږدول کیدی شي بیرته په مایع نایتروجن کې واچول شي او بیا وروسته په چټکۍ سره غوړ شي.په هرصورت، د داسې درملنې وروسته د حجرو وړتیا ممکن کمه شي.د ځینو حساسو حجرو لینونو لپاره، دا ممکن د حجرو بیا رغونه خورا ستونزمن کړي.دا پدیده د تودوخې د بدلون په پایله کې د حجرو دننه د یخ کرسټال په جوړښت کې د بدلون له امله فکر کیږي.له همدې امله سپارښتنه کیږي چې حجرې باید د رسیدو وروسته ژر تر ژره غوړ او کلتور شي.د ذخیره کولو وخت په -80 درجو کې کم کړئ.دا حرارت یوازې د ټرانسپورټ لپاره کارول کیږي.

په مکرر ډول پوښتل شوي حجرې کلتور 1
په مکرر ډول پوښتل شوي حجرې کلتور 2
په مکرر ډول پوښتل شوي حجرې کلتور 4
په مکرر ډول پوښتل شوي حجرې کلتور 3

2. د بیا رغونې لپاره د مایع نایتروجن څخه د حجرو د ایستلو په وخت کې کوم خوندیتوب تدابیر باید ونیول شي؟

په مایع نایتروجن کې د سیل کریوټیوبونه چې په بشپړ ډول سیل شوي ندي او مایع نایتروجن لري چې په دوی کې تیریږي د چاودنې لامل کیدی شي که چیرې د کرایوټوب تودوخه د تودوخې په وخت کې په چټکۍ سره لوړه شي.له همدې امله سپارښتنه کیږي چې چشمې او محافظتي دستکشې اغوستل شي کله چې د مایع نایټروجن حجرې لرې کړئ.د بیا ژوندي کولو لپاره، د یخولو ټیوب باید په دوامداره توګه د 37 درجې سانتي ګراد د اوبو حمام کې وغورځول شي ترڅو د یخ کولو محلول په 1-2 دقیقو کې په بشپړه توګه وچ شي.وروسته، د ټیوب بهر د الکول مسح سره پاک کړئ، بیا یې په الټرا کلین میز کې واچوئ او حجرې یې د 10 ملی لیتر کلچر میډیم سره اضافه شوي سینټریفیوج ټیوب ته انتقال کړئ، د 5-10 دقیقو لپاره په 1000 rpm کې سینټریفیوج کړئ، بیا یې پریږدئ. سوپرناټینټ، د کلتور منځنی مناسب مقدار اضافه کړئ او د کلتور فلاسک انوکول کړئ او په 5٪ CO2 انکیوبیټر کې انکیوبیټ کړئ.

3. ولې حجرې باید د مایع پړاو په ځای د مایع نایتروجن ټانک په بخار مرحله کې زیرمه شي؟

د مایع نایتروجن د ګاز په مرحله کې ذخیره شوي حجرې د بیا ژوندي کیدو احتمال ډیر دي.په داسې حال کې چې د مایع نایتروجن په مایع مرحله کې، که چیرې د لیوفیلیزیشن ټیوبونه په سمه توګه مهر شوي نه وي یا لیکونه ولري، د حجرو او مایع نایتروجن تر مینځ مستقیم تماس کولی شي د غوړیدو وروسته د حجرو د وړتیا سره موافقت وکړي.

4. د تعلیق حجرو لپاره، زه څنګه کولی شم د کلتور منځنی بدل کړم؟

د تعلیق حجرو کلتور کول په ساده ډول د تازه میډیا اضافه کولو سره (که چیرې ځای اجازه ورکړي) یا د سینټرفیوګیشن (100 xg د 5 دقیقو لپاره) په واسطه حجرې له زاړه مینځ څخه جلا کولو سره ترسره کیدی شي او وروسته په تازه مینځ کې د اوریدونکي حجرو بیا ځای پرځای کول.په هرصورت، د ډیری تعلیق سیل لینونو لپاره، په ساده ډول د منځني اضافه کول غوره طریقه ده.په هرصورت، منځنی باید نوي شي مخکې له دې چې حجرې خپل لوی سینتریشن کثافت ته ورسیږي.د حجرو د سنتریت کثافت د 3 x 10 5 او 2 x 10 6 ترمنځ توپیر لري د حجرو کرښې او کلتور شرایطو پورې اړه لري ( استراحت یا حرکت کول، د اکسیجن کچه او نور).حجرې باید د حجرو ټیټ غلظت ته ضعیف شي ترڅو د کافي مغذي موادو بیا رغونه ته اجازه ورکړي ترڅو حجرې په لوګاریتمیک ډول وده وکړي.که چیرې منځنی په ساده ډول د حجرو د کثافت کمولو پرته بدل شي، حجرې به په چټکۍ سره منځني له منځه یوسي او مړه شي.که حجرې د خپل کوچني کثافت څخه کمې شي، نو دوی به د ځنډ پړاو ته ننوځي او ډیر ورو وده وکړي یا به مړه شي.د هر تعلیق سیل لاین مختلف سنتریشن کثافت او د تیریدو وقفه لري ، نو د ورځني حجرو شمیره د تعلیق سیل لاینونو نظارت کولو لاره ده *.

5. د حجرو د کلتور لپاره وړاندیز شوی CO2 کچه څه ده؟

که څه هم د حجرو د کلتور په سیسټمونو کې د CO2 کچه له 0.03٪ څخه تر 40٪ پورې ده (په عموم کې شاوخوا 0.03٪ CO2 په اتموسفیر کې)، دا خورا عام دی چې هیڅ CO2 په هوا کې یا د CO2 غلظت له 5٪ څخه تر 10٪ پورې نه وي.دا مهمه ده چې د سوډیم بای کاربونیټ غلظت په متوسطه کې تنظیم کړئ ترڅو د ګاز په مرحله کې د CO2 کچه سره توازن وساتل شي.حجرې CO2 تولیدوي او د ودې او بقا لپاره لږ مقدار کاربونیک اسید ته اړتیا لري.که چیرې CO2 اضافه نشي او حجرې ضرب شي، 4 mM (0.34 g/L) د انهایډروس سوډیم بای کاربونیټ کارول کیدی شي.په هرصورت، د کلتور فلاسک پوښ باید پدې وخت کې ټینګ شي.که چیرې د کلتور سیسټم 5٪ یا 10٪ CO2 ته اړتیا ولري، په ترتیب سره 23.5 mM (1.97 g/L) یا 47 mm (3.95 g/L) سوډیم بای کاربونیټ په ترتیب سره په 37°C کې استعمال کړئ، د ابتدايي pH نږدې 7.6 سره.د دې شرایطو لاندې، فلاسک باید بې برخې پاتې شي یا د ګاز انډول ساتلو لپاره د پیټري ډش څخه کار واخیستل شي.

6. ولې ځینې حجرې سوډیم پیرویټ ته اړتیا لري؟څومره سوډیم پیرویټ باید میډیم ته اضافه کړم؟

Pyruvate یو عضوي اسید میټابولیټ دی چې په ګلایکولیتیک لاره کې * چې په اسانۍ سره حجرې ته ننوځي او پریږدي.له همدې امله، په منځني ډول د سوډیم پیرویټ اضافه کول د انابولیزم لپاره د انرژي سرچینه او د کاربن سرچینه دواړه چمتو کوي، د ځانګړو حجرو په ساتلو کې مرسته کوي، د حجرو کلونینګ سره مرسته کوي یا کله چې په منځني ډول د سیرم غلظت کم شي اړتیا وي.سوډیم پیرویټ هم د فلوروسینس هڅول شوي سایټوټوکسیت کمولو کې مرسته کوي.سوډیم pyruvate معمولا د 1 mM په وروستي غلظت کې اضافه کیږي.په سوداګریزه توګه شتون لري سوډیم پیروویټ محلولونه معمولا د 100 ملي میتر ذخیره کولو محلول (100X) دي.

د www.DeepL.com/Translator (وړیا نسخه) سره ژباړل شوی.


د پوسټ وخت: جون 21-2022